分光光度计工作曲线是一种常用的分析工具，可用于测量化学物质的浓度。通过测量未知样品的吸收或透射值，并结合工作曲线，可以确定样品中化学物质的浓度。这种方法在生物化学、环境科学和药学等领域都有广泛应用，对于研究和质量控制具有重要意义。
可见或紫外分光光度法都可用于测定溶液中物质的含量。测定标准溶液(浓度已知的溶液)和未知液(浓度待测定的溶液)的吸光度，进行比较，由于所用吸收池的厚度是一样的。也可以先测出不同浓度的标准液的吸光度，绘制标准曲线，在选定的浓度范围内标准曲线应该是一条直线，然后测定出未知液的吸光度，即可从标准曲线上查到其相对应的浓度。
分光光度计工作曲线的绘制涉及多个步骤，包括标准溶液的配制、绘制标准曲线、以及使用适当的曲线拟合方法。
一、标准溶液的配制：首先，需要配制一系列已知浓度的标准溶液和一个空白样。这一步骤可以参照教材必修2中的项目化学习《如何测定菠菜中铁元素的含量》进行。标准溶液的浓度范围应覆盖预期样品中可能存在的浓度，以确保工作曲线的准确性和适用性1。
二、绘制标准曲线：使用分光光度计测量每个标准溶液的吸光度，并绘制吸光度与浓度之间的关系曲线。理想情况下，标准曲线应该是一条直线，且R2R^2R2值应接近或等于1，以表明良好的线性关系。如果R2R^2R2值过低（如小于0.97），则应重新配制溶液并重新绘制曲线1。
三、曲线拟合方法：常见的曲线拟合方法包括线性回归、多项式回归和指数拟合等。对于呈线性关系的曲线，可以使用线性回归方法，通过最小二乘法求解斜率和截距，得到一条最佳拟合直线。如果数据点呈现非线性关系，可以考虑使用多项式回归方法，通过拟合高阶多项式来更好地逼近实际曲线。在某些情况下，数据点可能呈指数关系，使用指数拟合方法可以找到最佳的指数函数以拟合实验数据。
各种物质有它自己一定的吸收光谱曲线，因此用吸收光谱曲线图可以进行物质种类的鉴定。
